您現在所在的位置:6场半全场复式 > 研究方案 > 細胞研究
    研究方案

6场半全场对阵表:細胞研究

生物學家Wilson預言:“一切生命的關鍵問題都要到細胞中去找?!?。細胞是生物體生長、發育和繁殖的基礎。金開瑞組建了專門的細胞研究團隊,建立了強大的細胞研究平臺,主要包括干細胞研究、CRISPR/Cas9系統基因編輯、細胞功能分析,可為您提供全方位的從方案設計到細胞分離分析、功能研究與CRISPR/Cas9改造等一站式服務。

CRISPR/Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)系統是繼ZNF和TALENS技術之后的第三代基因編輯技術,被廣泛應用于細胞水平和個體水平基因編輯細胞系和模式動物的建立。CRISPR/Cas9系統利用sgRNA/Cas9復合體識別并在DNA特異位點造成雙鏈斷裂,利用細胞自身修復機制或者與外源DNA同源重組實現基因敲、敲入和序列突變。利用CRISPR/Cas9技術使動物基因組發生可遺傳變異,現已廣泛用于基因編輯動物建立。將體外轉錄的sgRNA和Cas9 mRNA或者體外翻譯的Cas9蛋白對小鼠/大鼠受精卵單細胞進行胞質或者原核顯微注射后,得到基因敲除、敲入或者定點突變的編輯鼠。

服務內容

基因敲除細胞系建立;
基因敲入細胞系建立;
基因定點突變細胞系建立。

客戶提供

目的基因序列信息(Gen Bank Accession number、Gene ID、關鍵詞);
細胞類型及名稱(也可選擇由金開瑞代購),細胞培養條件。

最終交付

sgRNA序列;
基因敲除/敲入/突變單克隆細胞系;
sgRNA-Cas9基因敲除/敲入/突變質粒鑒定測序結果;
結題報告(包括實驗步驟、測序結果及相關原始圖片)。

案例展示

Cas9技術敲除細胞系構建案例:

Step 1: sgRNA設計

Step 2: 細胞抗藥性篩選預實驗(不加puro和添加1ug/ml puro)

Step 3:轉染或感染效率測試:明場和綠色熒光

Step 4: 藥物篩選、單克隆培養及單克隆細胞系靶點檢測